該小動物模型飼養(yǎng)在清潔級動物中，微生物處于監(jiān)控狀態(tài)，動物房有相應(yīng)的保護措施，小鼠不會出現(xiàn)逃逸，不會對外界環(huán)境造成影響。

此KPC品系為他莫昔芬誘導(dǎo)胰腺導(dǎo)管腺癌(PDAC)模型小鼠，攜帶Kras LSL G12D (Krastm4Tyj)等位基因、Trp53tm1Brn floxed等位基因和Tg(Pdx1-cre/Esr1*)#Dam轉(zhuǎn)基因。KPC品系小鼠在他莫昔芬給藥后8-10周內(nèi)出現(xiàn)腺泡導(dǎo)管化生和胰腺上皮內(nèi)瘤變(PanIN)，并在14-16周內(nèi)進展為浸潤性胰腺導(dǎo)管腺癌。 其時程和轉(zhuǎn)移擴散（至肝、肺、腹膜壁層和隔膜）與在PDAC的KPC模型中觀察到的表型相似。 胰腺組織學(xué)分析顯示，其多灶性腫瘤類型與KPC模型中所見的腫瘤類型相同。

Krastm4Tyj等位基因[KrasLSL-G12D]包含點突變(G12D)，但是因為存在loxP終止密碼子，該突變表達受阻。此Krastm4Tyj等位基因純合小鼠會出現(xiàn)宮內(nèi)死亡。Cre 介導(dǎo)的重組可以切除終止密碼子，使致癌蛋白得以表達。

Trp53tm1Brn等位基因[p53LoxP]在P53基因2至10號外顯子的兩側(cè)包含LoxP位點。Trp53tm1Brn等位基因純合小鼠生育能力雖有所降低，但仍可育種。Cre介導(dǎo)的 floxed序列缺失會導(dǎo)致等位基因敲除。

Tg(Pdx1-cre/Esr1*)#Dam 轉(zhuǎn)基因[Pdx1-CreER]具有小鼠Pdx1啟動子，能夠表達他莫昔芬誘導(dǎo)型Cre重組酶（Cre-ERTM；Cre重組酶與小鼠雌激素受體配體結(jié)合域的 G525R 突變體融合）。

如針對品系貨號024968小鼠所述，該Pdx1-CreER轉(zhuǎn)基因純合小鼠可存活且有生育能力。免疫組化分析結(jié)果證明，轉(zhuǎn)基因表達與內(nèi)源性Pdx1模式關(guān)聯(lián)密切。該轉(zhuǎn)基因表達可見于胰腺的腺泡、胰島和導(dǎo)管細胞，但未見于間充質(zhì)細胞（源自內(nèi)皮和間充質(zhì)的平滑肌細胞）。到E10.5，胰腺上皮中可檢出較高的Cre表達。

此 KrasLSL-G12D;p53LoxP;Pdx1-CreER三重突變品系通過以下三種單重突變品系雜交獲得：

B6.129S4-Krastm4Tyj/J（品系貨號 008179）

B6.129P2-Trp53tm1Brn/J（品系貨號 008462）

Tg(Pdx1-cre/Esr1*)#Dam/J 品系（品系貨號 024968）

對于Krastm4Tyj 等位基因[KrasLSL-G12D]，研究人員精心設(shè)計了靶向載體，將 G12D點突變置于基因外顯子1上，并將兩側(cè)有l(wèi)oxP位點的終止元件置于突變的上游位置。終止元件在5'端以相反方向整合PGK-嘌呤霉素選擇原件。將腺病毒強剪接受體（通常用于基因誘捕載體）融合在his3填充片段的上游位置，以防止在終止子周圍剪接（如果轉(zhuǎn)錄未完全沉默）。突變剪接供體位點位于3'端和SV40 PolyA四聚體串聯(lián)陣列上。終止子的設(shè)計與基因組Sal1或Xho1位點剛好匹配。終止信號原件會阻止突變體 Kras表達，直至該信號原件被Cre介導(dǎo)的重組除去后，致癌Kras方能表達。該構(gòu)建體電轉(zhuǎn)化入源自129S4/SvJae的J1胚胎干(ES)細胞。捐贈實驗室將此品系小鼠與C57BL/6小鼠回交10代以上，并使用5'端和3'端外源和內(nèi)源探針，通過Southern印跡檢測驗證了方向的正確性。

對于Trp53tm1Brn突變 [p53LoxP或p53flox]，研究人員使用靶向載體在基因的1號和 10號內(nèi)含子兩側(cè)導(dǎo)入了loxP位點。使用源自IB10/E14IB10 129P2/OlaHsd的胚胎干細胞系創(chuàng)建突變，之后將小鼠與C57BL/6回交八代。

對于Tg(Pdx1-cre/Esr1*)#Dam轉(zhuǎn)基因[Pdx1-CreER]，將Cre-ERTM序列（Cre 重組酶與小鼠雌激素受體配體結(jié)合域 G525R 突變體融合）導(dǎo)入小鼠 Pdx1 的啟動子 ATG，然后導(dǎo)入SV40多聚腺苷酸化信號。將轉(zhuǎn)基因載體注入B6CBAF1胚胎。所得小鼠一開始先與遠交ICR或CD1小鼠雜交，之后再與C57BL/6小鼠回交。 與ICR/CD1和 C57BL/6小鼠的后續(xù)雜交使得該品系成為混合遺傳背景。

胃癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，在我國其發(fā)病率居各類腫瘤的首位，胃癌可發(fā)生于任何年齡，每年約17萬人死于胃癌。

惡性腫瘤胃癌起源于胃壁最表層的粘膜上皮細胞，可發(fā)生于胃的各個部位（胃竇幽門區(qū)最多、胃底賁門區(qū)次之、胃體部略少），可侵犯胃壁的不同深度和廣度。癌灶局限在粘膜內(nèi)或粘膜下層的稱為早期胃癌，侵犯肌層以深或有轉(zhuǎn)移到胃以外區(qū)域者稱為進展期胃癌。肉眼或胃鏡觀察胃癌有多種形態(tài)，如表淺型、腫塊型、潰瘍型、浸潤型、潰瘍癌（為慢性胃潰瘍癌變）。